Western快速封閉液
Rapid Blocking Buffer for
WB
● 產(chǎn)品組成:
貨號
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名稱(chēng)
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規格
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保存條件
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WR5020-100ml
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Western快速封閉液
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100 ml
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2-8℃
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WR5020-500ml
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Western快速封閉液
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500 ml
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2-8℃
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說(shuō)明書(shū)
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一份
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● 產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
本產(chǎn)品專(zhuān)為快速高效封閉Western Blot 轉印膜而設計,避免抗體與封閉劑的非特異結合,最大程度地降低了背景。同時(shí),本封閉劑無(wú)內源的磷酸化蛋白及生物素,對磷酸化特異抗體及生物素檢測也不會(huì )產(chǎn)生干擾。本封閉劑不與蛋白產(chǎn)生非特異性結合,因而只封閉膜而不會(huì )屏蔽樣品蛋白的抗體識別位點(diǎn),大大提高了抗體檢測靈敏度。實(shí)驗表明,本封閉劑對許多抗體都有不同程度的信號增強作用。然而這種信號增強作用因抗體而異,對某一特定抗體,并不一定具有確定的信號增強作用。
注意: 沒(méi)有任何一種封閉劑能適合所有抗原和抗體的檢測系統。如出現本試劑不適合的抗體,請替換使用其它種類(lèi)的封閉劑如BSA或脫脂奶粉等。
● 貯存、效期及運輸:
2-8℃貯存,有效期一年,常溫運輸。
● 注意事項:
1. 快速高效:5-10 min內完成封閉;只結合封閉轉印膜而不結合蛋白,因此不會(huì )屏蔽樣品蛋白的抗體識別位點(diǎn),與傳統的脫脂奶粉和BSA 封閉相比信噪比更高;
2. 方便快捷:無(wú)需稀釋?zhuān)慈〖从茫?
3. 性能可靠:與抗體無(wú)交叉反應;
4. 應用范圍廣:無(wú)磷酸化蛋白,無(wú)生物素,尤其適合磷酸化特異抗體及生物素檢測系統;
5. 節省抗體:使用本封閉劑后,所需的最適抗體濃度低于常規使用濃度,可大大節省抗體使用量。
6. 與PVDF膜相比,NC膜需要更長(cháng)時(shí)間的封閉。
● 使用說(shuō)明:
1. 本產(chǎn)品無(wú)需稀釋?zhuān)_(kāi)蓋即用。
2. 完成轉膜后,使用TBST漂洗轉印膜3次,每次5分鐘;
3. 將轉印膜放入到雜交孵育盒中,加入10-20 ml快速封閉液完全覆蓋轉印膜,置于搖床輕輕搖動(dòng),參考下表確定封閉時(shí)間:
膜類(lèi)型
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推薦封閉時(shí)間
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反應溫度
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PVDF膜
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5-10分鐘
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常溫 25度
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NC膜
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10-20 分鐘
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常溫25度
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注意:使用本產(chǎn)品,PVDF膜和NC膜使用推薦封閉時(shí)間,經(jīng)多種抗體的測試封閉效果顯著(zhù)優(yōu)于常規的BSA封閉1 h。對于一些背景非常高的抗體,可以嘗試延長(cháng)封閉時(shí)間。如有特殊需要,也可4℃封閉過(guò)夜。
4. 封閉結束后棄去封閉液,進(jìn)行Western Blot后續操作。