非變性電泳蛋白質(zhì)Marker（45-880 kD）

蛋白名稱(chēng)	分子量(kD)	蛋白來(lái)源	pI	說(shuō)明
Ferritin	440 880	equine spleen	N/A	非變性下440kD和880 kD
Carbonic Anhydrase	300	Bovine Erythrocytes	6.4	單體分子量29kD，非變性下為多聚體，表現為多種電荷異構體（charge isomer）
Albumin	66	bovine serum	4.6-5.8	球蛋白，單體分子量66 kD，非變性下可形成少量二聚體
Ovalbumin	45	egg white	4.71或 4.59	球蛋白，分子量為45kD，非變性條件下大于45kD會(huì )出現電荷異構體（charge isomer）

● 使用說(shuō)明：

1. 取出產(chǎn)品后，常溫融化后，徹底混勻，上樣電泳。

注：上樣量根據膠的厚度和梳子的寬度確定。一般說(shuō)來(lái)，1.0厚度10齒梳子加樣孔上樣5 μl，1.0厚度15齒梳子加樣孔上樣量2.5 μl，其他規格梳子請適當調整上樣量。

2. 該產(chǎn)品不含蛋白凝膠制備試劑，您可以選擇非變性PAGE凝膠制備及電泳試劑盒（貨號：RTD6130）或者蛋白預制膠（貨號RTD6118）。如自備試劑，經(jīng)典Laemmli系統中把制膠溶液、電泳緩沖液和上樣緩沖液中的SDS和還原劑（DTT或β-巰基乙醇）全部去除即可進(jìn)行非變性電泳。

3. 電泳條件：

建議使用8%非變性等度膠或者4-15%非變性梯度膠進(jìn)行電泳。

恒電壓	150-200 V
起始電流	27-35 mA/板膠
結束電流	7-10 mA/板膠
電泳時(shí)間	50-80min+

4. 電泳結束后，考馬斯亮藍染色，觀(guān)察結果。

注：使用銀染染色時(shí)，由于靈敏度高于考馬斯亮藍染色方法，需要適當降低Marker上樣量，一般稀釋50倍后上樣。

注意：

1.本蛋白Marker不適用于變性蛋白電泳(SDS-PAGE)。
2. 蛋白非變性電泳條件下，不能精確判斷蛋白的分子量大小。因為在非變性條件下，蛋白的電荷，空間結構，物化性質(zhì)等都對蛋白的遷移有影響。
3.非變性蛋白電泳Marker（RTD6137，RTD6142，RTD6144）由于要保持蛋白的天然結構，都沒(méi)有偶聯(lián)染料，在電泳時(shí)基本都看不到條帶；然而，RTD6137和RTD6144中的440 kD和880 kD由于天然蛋白中含有鐵離子，使得電泳后在膠上可見(jiàn)淡黃色，其中440 kD顏色更深。凝膠轉膜后，膜上也可以看到黃色的440 kD條帶，可以大體判斷Marker轉膜的效果。
4. 非變性Marker轉膜后可以后用麗春紅染色液（貨號：RTD6301）染膜，可以看到Marker條帶，順便可以檢測轉膜效率，然而要注意的是麗春紅染色靈敏度比較低，可能不能完全看到完整的Marker條帶。

● 實(shí)驗示例：

使用RTD6137非變性電泳蛋白質(zhì)Marker（45-880 kD）產(chǎn)品發(fā)表部分文章列表：

1. [2022 IF=8.0] Tektin bundle interacting protein, TEKTIP1, functions to stabilize the tektin bundle and axoneme in mouse sperm flagella

Author: Xin?Yan Geng,Hui?Juan Jin, Lan Xia.Bin?Bin Wang,Su?Ren Chen

Marker: RTD6137非變性電泳蛋白質(zhì)Marker（45-880 kD）

Journal: Cellular and Molecular Life Sciences (2024) 81:118

Institution: Beijing Normal University

Paper link：https://doi.org/10.1007/s00018-023-05081-3

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