PCR產(chǎn)物純化試劑盒(目錄號:RTP2202)
試劑盒內容及保存:
試劑盒組成
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RTP2202-02
(100次)
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RTP2202-03
(200次)
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貯存方式
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結合液PB
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100 ml
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2×100ml
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室溫
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3 M NaAc pH5.2
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500 μl
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500 μl
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室溫
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漂洗液PW
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25 ml
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2×25
ml
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室溫
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洗脫緩沖液EB
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15 ml
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15 ml
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室溫
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吸附柱CA2
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100個(gè)
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2×100個(gè)
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室溫
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收集管(2 ml)
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100個(gè)
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2×100個(gè)
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室溫
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說(shuō)明書(shū)
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1份
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1份
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儲存條件:
本試劑盒在室溫(15–25℃)干燥條件下,可保存12個(gè)月;更長(cháng)時(shí)間的保存可置于2–8℃。(注意:當低溫貯存時(shí),使用前應先將試劑盒內的溶液在室溫中放置一段時(shí)間,必要時(shí)可在37℃水浴中預熱10-20分鐘,以平衡溶液溫度。)
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
本試劑盒采用離心吸附柱結合獨特的緩沖液系統,從酶切、PCR等反應溶液中純化DNA片段,同時(shí)除去蛋白質(zhì)、無(wú)機鹽離子及寡核苷酸引物等雜質(zhì)。使用本試劑盒可回收100bp–10kb的DNA片段,回收率大于80%(<100 bp 和>10kb 的DNA片段回收率為30-50 %)。
每個(gè)吸附柱每次最多可吸附的DNA量約為10 μg。
使用本試劑盒回收的DNA可適用于各種常規操作,包括酶切、測序、文庫篩選、連接和轉化等實(shí)驗。
產(chǎn)品特點(diǎn):
1 結合液PB為亮黃色,便于觀(guān)察體系的pH是否合適。
2 操作快捷,單個(gè)樣品操作少于10分鐘。
操作步驟:
如非指出,所有離心步驟均為使用臺式離心機在室溫下離心。
1 在PCR反應液中直接加入5倍體積的PB液,顛倒混勻后,全部加入到吸附柱CA2中,10,000g離心30-60秒,到掉收集管中的廢液,將吸附柱CA2重新放入收集管中。
注:● 如果PCR反應體系使用了石蠟油,無(wú)需去除,但要使用10倍體積的PB液。
● 如果反應體系小于50μl,用水補至50μl體系,再加入PB液。
● 如果體系體積大于700μl,請分次上柱,保證全部溶液均加入到吸附柱中。
2
向吸附柱CA2中加入700μl漂洗液PW(使用前請先檢查是否已加入無(wú)水乙醇),10,000g離心30-60秒,倒掉廢液,將吸附柱重新放入收集管中。
3
向吸附柱CA2中加入500μl漂洗液PW,10,000g離心30-60秒,倒掉廢液。
4
將離心吸附柱CA2放回收集管中,10,000g離心2分鐘,盡量除去漂洗液。
注意:此步必不可少!如果漂洗液有殘留,將會(huì )影響回收效率和DNA質(zhì)量,進(jìn)而影響下游實(shí)驗;離心后將吸附柱蓋子打開(kāi),室溫放置2分鐘,這樣將有助于徹底揮發(fā)殘余乙醇。
5 將吸附柱放到一個(gè)干凈離心管中,向吸附膜中間位置懸空滴加適量洗脫緩沖液EB,室溫放置2分鐘。10,000g離心2分鐘收集DNA溶液。
注意:
● 可將洗脫緩沖液EB預熱到60-70℃后再加到吸附膜上,這樣可以提高洗脫效率。
● CA2柱的洗脫體積不應少于20
μl,體積過(guò)小將會(huì )降低回收效率。
● 洗脫液的pH值對于洗脫效率有很大影響。若用水做洗脫液應保證其pH值在7.0-8.5范圍內,pH值低于7.0會(huì )降低洗脫效率
6 DNA產(chǎn)物-20℃保存。
RTP2202 PCR產(chǎn)物純化試劑盒發(fā)表文章
1. [2012 IF=0.903] T Polymorphisms in major
histocompatibility complex class IIa genes are associated with resistance to
infectious hematopoietic necrosis in rainbow trout, Oncorhynchus mykiss
(Walbaum, 1792).
Author: Z. Liu, D.-D. Hu, S.-J. Shao, J.-Q. Huang, J.-F. Wang and J. Yang
Product: RTP2202 PCR產(chǎn)物純化試劑盒
Journal: J. Appl. Ichthyol. 29 (2013), 1234–1240
Institution:College of
Animal Science and Technology, Gansu Agricultural University
Paper link:https://onlinelibrary.wiley.com/doi/full/10.1111/jai.12326
2. [2012 IF=1.958] Cloning, bioinformatics and the enzyme
activity analyses of a phenylalanine ammonia-lyase gene involved in dragon’s blood biosynthesis in Dracaena
cambodiana.
Author: Xing-Hong Wang,Changhe Zhang
Product: RTP2202 PCR產(chǎn)物純化試劑盒
Journal: Mol Biol Rep (2013) 40:97–107
Institution:Yunnan Institute
of Microbiology, Yunnan University
Paper link:https://link.springer.com/article/10.1007/s11033-012-2032-y
3. [2015 IF=1.32] Association between MHC II beta chain gene
polymorphisms and resistance to infectious haematopoietic necrosis virus in
rainbow trout (Oncorhynchus mykiss, Walbaum, 1792).
Author: Juan Yang, Zhe Liu, Hai-Na Shi, Jiu-Pan Zhang, Jian-Fu Wang, Jin-Qiang
Huang & Yu-Jun Kang
Product: RTP2202 PCR產(chǎn)物純化試劑盒
Journal: Aquaculture Research, 2016, 47,
570–578
Institution:College of
Animal Science and Technology, Gansu Agricultural University
Paper link: https://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1111/are.12516